FC融合蛋白純化應(yīng)用案例
簡介
Fc融合蛋白是指將目標(biāo)蛋白（protein of interest, POI）與免疫球蛋白（如IgG、IgA等）的Fc片段融合而產(chǎn)生的新型重組蛋白。該目標(biāo)蛋白（POI）可以是細(xì)胞因子、受體、抗原肽或者其它具有生物學(xué)活性的功能蛋白分子。大多數(shù)情況下，F(xiàn)c融合蛋白不僅可發(fā)揮所融合蛋白的生物學(xué)活性，還具有一些抗體的性質(zhì)，有潛在的臨床治療能力。這種將目標(biāo)蛋白與Fc進(jìn)行融合的設(shè)計(jì)，主要目的是通過延長血漿半衰期，加強(qiáng)其治療能力，同時(shí)，融合Fc片段能夠增大分子體積，降低腎清除率。
近年來，生物藥市場保持高速增長的趨勢，抗體藥物、融合蛋白藥物在腫瘤、自身免疫病發(fā)揮了巨大的作用，造?；颊叩耐瑫r(shí)助推這兩個(gè)細(xì)分市場持續(xù)擴(kuò)容。2018年上半年全球藥物銷售額Top 15 ，F(xiàn)c融合蛋白類藥物(Amgen/Pfizer的Enbrel和Bayer/Regeneron的Eylea)銷售占兩席，其中Enbrel的2018年上半年銷售額達(dá)34.64億美元。
純化工藝
FC融合蛋白在動(dòng)物細(xì)胞表達(dá)上清中穩(wěn)定性較差，容易形成降解和多聚。如何去除產(chǎn)品相關(guān)雜質(zhì)，如降解和多聚，以及除去工藝相關(guān)雜質(zhì)，如HCP、Protein A 脫落等，提供了如下純化方案：
1.用親和捕獲Fc融合蛋白；
2.用疏水層析進(jìn)一步去除降解片段及錯(cuò)配抗體;
3.用陽離子層析去除大量的聚集體。
結(jié)果
經(jīng)過第一步UniMab® 50 進(jìn)行捕獲，純度提高到 80% 以上，ProA 脫落小于10 ppm 、HCP殘留小于1000 ppm ；Uni®HR Phenyl-30L進(jìn)一步去除降解片段、錯(cuò)配抗體、ProA 脫落、HCP殘留；NanoGel™- 50SP精純后，ProA 脫落小于1 ppm , HCP殘留小于50 ppm，純度大于95%，符合抗體藥物殘留標(biāo)準(zhǔn)。
注：獲得完整版信息，請聯(lián)系我們
訂貨信息：
Copyright ? 2019 蘇州納微 All rights reserved 納微集團(tuán)成員：
中小分子